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皮質(zhì)醇檢測(cè)試劑盒操作方法及原理

更新時(shí)間:2021-05-17      瀏覽次數(shù):1766

皮質(zhì)醇檢測(cè)試劑盒操作方法及原理

[背景]:皮質(zhì)醇,是糖皮質(zhì)激素中的一種類固醇激素。在人類中,它由腎上腺中的腎上腺皮質(zhì)束狀帶產(chǎn)生,在壓力和低血糖時(shí)釋放,可作為壓力的一個(gè)生物標(biāo)志物。皮質(zhì)醇的產(chǎn)量與ACTH依賴的晝夜節(jié)律相關(guān),在早晨達(dá)到峰值,隨后逐漸降低。皮質(zhì)醇在很多基質(zhì)中可被檢測(cè)到,如血液、糞便、尿液和唾液。血清中90-95%的皮質(zhì)醇與蛋白結(jié)合,包括皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白和血清白蛋白。皮質(zhì)醇主要參與代謝和免疫。在代謝方面,它可促進(jìn)糖異生、肝糖原沉積和降低葡萄糖利用率。在免疫方面,作為重要的抗炎因子,在過(guò)敏、免疫抑制和疾病抵抗中發(fā)揮重要作用。異常的皮質(zhì)醇水平與許多狀況有關(guān),包括前列腺癌、抑郁癥和精神分裂癥。身體組織中皮質(zhì)醇過(guò)高是庫(kù)欣綜合征的誘因。
[檢測(cè)原理]:本試劑盒采用固相競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。兔抗小鼠多克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。皮質(zhì)醇特異性的單克隆抗體加入至孔中,經(jīng)過(guò)孵育,與固相抗體結(jié)合。洗滌后,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的皮質(zhì)醇和未標(biāo)記的皮質(zhì)醇或樣本,競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合單克隆抗體上有限的結(jié)合位點(diǎn)。在洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入顯色底物,顏色反應(yīng)的深淺與皮質(zhì)醇的濃度成反比。加入終止液終止反應(yīng),在 450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng) 570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。                                                           樣本類型]:血清、血漿、細(xì)胞上清、組織等相關(guān)生物樣本。                                                              [規(guī)格型式]:96孔板、48孔板,可拆卸                                                                                              [保存條件]:試劑盒未拆開,2-8℃保存。已拆開,標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存,其它2-8℃℃保存。                   [有效期]:6個(gè)月。

敏感性/Z低檢測(cè)濃度計(jì)算方式:敏感性等于20個(gè)空白對(duì)照孔的平均O.D.值加上2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差后對(duì)應(yīng)的濃度。樣品的O.D.讀數(shù)只有在高過(guò)敏感性指標(biāo)的時(shí)候才具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。                                           [變異系數(shù)]:板內(nèi)變異系數(shù)<10%,板間變異系數(shù)<15%。                                                                    [回收率]:三組已知的高、中、低濃度樣品,進(jìn)行五次回收率評(píng)估,回收率在85%-115%之間。
[需用戶自己提供的實(shí)驗(yàn)器材和試劑]:                                                                                              1. 96孔讀板儀器。
2. 自動(dòng)洗板機(jī).
3. 移液器和槍頭。建議使用多通道移液器/排槍。
4. Eppendorf 管。

 

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